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　　DiI、DiO、DiD、DiR是細(xì)胞膜熒光探針親脂性的熒光染料，可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。這些環(huán)境敏感性熒光染料在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱，當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)。且具有消光系數(shù)高、極性依賴性、激發(fā)態(tài)壽命短等特點(diǎn)。一旦進(jìn)入細(xì)胞膜后，可在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散，較佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。

 

　　細(xì)胞膜熒光探針應(yīng)用不同的熒光染色（DiI橙色熒光、DiO綠色熒光、DiD紅色熒光、DiR深紅色熒光）為活細(xì)胞多標(biāo)、流式分析提供了便利：

　　1、DiO和DiI可分別用標(biāo)準(zhǔn)的FITC濾光片和TRITC濾光片檢測。

　　2、DiD是DiI的衍生物，具有明顯往紅光遷移的激發(fā)和發(fā)射光譜，可以被633nm He-Ne激光激發(fā)，并且具有比DiI更長的激發(fā)和發(fā)射光波長，這一特性使其特別適合標(biāo)記具顯著自熒光效應(yīng)的細(xì)胞或組織。

　　3、DiR具強(qiáng)效的近紅外光穿透細(xì)胞或組織，并在近紅外區(qū)具較低的自熒光水平，這些特性使其特適用于體內(nèi)成像或示蹤實(shí)驗(yàn)。

 

　　顯微鏡檢測：

　　1、DiD，DiO，DiI，DiR激發(fā)波長與發(fā)射波長；

　　2、多色染料的同時(shí)檢測，濾光器按照以下設(shè)定：

　?、貲iI和DiO=Omega XF52，Chroma 51004；

　?、贒iI和DiD=Omega XF92，Chroma 51007；

　?、跠iI，DiO和DiD=Omega XF93，Chroma 61005。

 

　　流式細(xì)胞儀的檢測：

　　DiD、DiO、DiI、DiR和DiS染色的細(xì)胞可以分別用經(jīng)典的FL1，F(xiàn)L2，F(xiàn)L3和FL4流式細(xì)胞儀檢測。